聚丙烯酰胺想必大家都有所了解,那你知道聚丙烯酰胺凝膠電泳是什么嗎?下面我們一起簡(jiǎn)單了解下相關(guān)知識(shí)。
聚丙烯酰胺凝膠電泳(polyacryamide gel electropHoresis, PAGE)是由丙烯酰胺單體和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化作用下形成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)。在不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳中,凝膠的制作是分層進(jìn)行的,因此凝膠不僅有分子篩效應(yīng),還具有濃縮效應(yīng);和瓊脂糖凝膠相比,聚丙烯酰胺凝膠難于制備和處理。它們的分離范圍較窄。但是它們也有突出的優(yōu)點(diǎn),由于是不連續(xù)的pH 梯度,故樣品被壓縮成一條狹窄的區(qū)帶,因而增強(qiáng)了分離效果,提高電泳分辨率。尤其對(duì)小DNA 片段的分析(5~500bp)。在這一范圍內(nèi),僅差1bp 的DNA 分子也能清晰地分開。其次,DNA 純度很高。在生產(chǎn)聚丙烯酰胺凝膠中得到的DNA 純度很高以致于下步操作不用任何處理。還有,它的負(fù)載容量高。該膠的標(biāo)準(zhǔn)加樣槽中可以加入高達(dá)10mL 的DNA 樣品,而不影響電泳分辨率。多應(yīng)用于分離純化和鑒定大小為5~500bp 的DNA 片段。
聚丙烯酰胺凝膠電泳有連續(xù)與不連續(xù)體系兩種,前者指在整個(gè)電泳體系中的緩沖液pH 值和凝膠孔徑大小相同,主要用于核酸分析。后者主要用于蛋白質(zhì)樣品的分離,它除了電泳槽中的緩沖體系和pH 值與凝膠中不同外,凝膠本身也由緩沖體系、pH 值和凝膠孔徑不同的兩種凝膠堆積而成。簡(jiǎn)單的說就是有正電向負(fù)電移動(dòng)。增加電荷的生成、從而得到高分子聚合物。
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